Calculadora de eficiencia de transformación: UFC por µg de ADN
Calcula la eficiencia de transformación de tus células competentes en UFC/µg a partir de las colonias, el ADN usado y la fracción de la recuperación que sembraste.
Cómo funciona
Eficiencia (UFC/µg) = colonias ÷ [ADN en µg × (volumen sembrado ÷ volumen total de recuperación)]
La eficiencia de transformación lleva el número de colonias a la cantidad de ADN que realmente se sembró en la placa, para que puedas comparar lotes de células competentes en la misma escala. Como normalmente solo siembras una parte de la recuperación, el ADN que llegó a la placa es el ADN total multiplicado por la fracción sembrada. Las células químicamente competentes suelen alcanzar de 10⁶ a 10⁸ UFC/µg y las electrocompetentes de 10⁹ a 10¹⁰; un valor bajo apunta a células en mal estado, exceso de ADN o sales arrastradas a la electroporación.
Ejemplo resuelto
Ana transforma con 10 ng (0.01 µg) de plásmido, recupera en 1,000 µL y siembra 100 µL, o sea, el 10% de la reacción: en la placa quedan 0.001 µg de ADN. Si crecen 200 colonias, la eficiencia es 200 ÷ 0.001 = 2 × 10⁵ UFC/µg. Con 400 colonias sería 4 × 10⁵ UFC/µg.
Preguntas frecuentes
¿Uso el ADN total o solo la fracción sembrada?
Solo la fracción que realmente sembraste. La eficiencia son colonias por µg del ADN que tuvo oportunidad de formar una colonia en esa placa, así que multiplica el ADN por (volumen sembrado ÷ volumen total).
¿Cuál es una buena eficiencia de transformación?
En células químicamente competentes lo típico es de 10⁶ a 10⁸ UFC/µg; las electrocompetentes llegan a 10⁹–10¹⁰. Para clonar una ligación de rutina basta con unas 10⁵.
¿Por qué mi eficiencia salió más baja de lo esperado?
Las causas más comunes son células competentes viejas o que se calentaron, demasiado ADN (satura la captación), restos de sal en la electroporación o sembrar en placas con la concentración de antibiótico equivocada.
Calculadoras relacionadas
Esta calculadora tiene fines informativos. Verifica los resultados importantes antes de tomar decisiones.