Calculadora de densidad celular: células/mL y células totales de tu cultivo
Convierte el conteo en hemocitómetro en densidad celular (células por mL) y en el total de células del cultivo, con las células contadas, los cuadros y el factor de dilución.
Cómo funciona
Células/mL = (células contadas ÷ cuadros) × factor de dilución × 10⁴ · Células totales = densidad × volumen
La cámara de un hemocitómetro estándar (como la de Neubauer) tiene 0.1 mm de profundidad y cada cuadro grande de las esquinas mide 1 mm × 1 mm, así que sobre cada cuadro caben exactamente 1 × 10⁻⁴ mL de muestra. El promedio de células por cuadro, multiplicado por el factor de dilución y por la constante de la cámara, 10⁴, te da la densidad en células por mililitro. Si además multiplicas por el volumen del cultivo obtienes el rendimiento total, que es el número que realmente vas a sembrar, congelar o tratar.
Ejemplo resuelto
Jimena cuenta 250 células en 4 cuadros de las esquinas: 62.5 células por cuadro. Como mezcló 1:1 con azul de tripano, el factor es 2: 62.5 × 2 × 10⁴ = 1.25 × 10⁶ células/mL, o 1,250 células por µL. En un cultivo de 10 mL tiene 1.25 × 10⁷ células en total.
Fuentes: Hemocytometer — Wikipedia
Preguntas frecuentes
¿De dónde sale el factor 10⁴?
Cada cuadro de 1 mm² con 0.1 mm de profundidad encierra 0.1 mm³ = 1 × 10⁻⁴ mL. Dividir el conteo por cuadro entre ese volumen, es decir, multiplicarlo por 10⁴, convierte células por cuadro en células por mililitro.
¿Cuántos cuadros debo contar?
Cuenta los cuatro (o cinco) cuadros grandes de las esquinas y promédialos para que el resultado sea confiable; lo ideal son 50–100 células por cuadro. Con muy pocas células el conteo tiene mucho ruido estadístico y con demasiadas es difícil contar bien.
¿Qué factor de dilución uso con azul de tripano?
Si mezclas las células 1:1 con azul de tripano, el volumen se duplica y el factor de dilución es 2. Ajústalo si hiciste cualquier otra dilución antes de cargar la cámara.
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Estimación con fines educativos, no es consejo médico ni de laboratorio: verifica las fórmulas, las unidades y los supuestos para tu protocolo.