🧬

Calculadora de Km y Vmax: cinética enzimática con la gráfica de Lineweaver-Burk

Calcula la Km y la Vmax de una enzima con dos puntos de concentración de sustrato y velocidad, usando dobles recíprocos (Lineweaver-Burk) y la eficiencia catalítica.

Sustrato [S]₁

Velocidad v₁

Sustrato [S]₂

Velocidad v₂

Cargando calculadora…

Cómo funciona

1/v = (Km ÷ Vmax) × (1/[S]) + 1/Vmax · Vmax = 1 ÷ ordenada al origen · Km = pendiente × Vmax

La ecuación de Michaelis-Menten, v = Vmax × [S] ÷ (Km + [S]), describe una curva, pero si sacas el recíproco de ambos lados se convierte en una recta de 1/v contra 1/[S]: la gráfica de Lineweaver-Burk o de dobles recíprocos. La ordenada al origen es 1/Vmax y la pendiente es Km/Vmax, así que con dos puntos quedan fijadas ambas constantes. La Km es la concentración de sustrato con la que la reacción va a la mitad de su velocidad máxima y refleja la afinidad de la enzima por el sustrato; el cociente Vmax/Km mide la eficiencia catalítica cuando hay poco sustrato.

Ejemplo resuelto

En una práctica de bioquímica, Sofía mide 28.57 µM/s con [S] = 2 mM y 80 µM/s con [S] = 20 mM. En recíprocos, la recta tiene pendiente 0.05 y ordenada al origen 0.01, así que Vmax = 1 ÷ 0.01 = 100 µM/s y Km = 0.05 × 100 = 5 mM. La eficiencia catalítica es 100 ÷ 5 ≈ 20.

Fuentes: Lineweaver–Burk plot — Wikipedia

Preguntas frecuentes

¿Para qué se usa la gráfica de dobles recíprocos?

Los recíprocos convierten la hipérbola de Michaelis-Menten en una recta, y de su ajuste salen la Km y la Vmax. Es fácil de hacer a mano, aunque le da demasiado peso a los puntos con poco sustrato; hoy se prefiere la regresión no lineal.

¿Qué significa la Km?

Es la concentración de sustrato con la que la reacción alcanza la mitad de su velocidad máxima. Una Km baja indica que la enzima llega a media velocidad con poco sustrato, señal de una unión fuerte (alta afinidad).

¿Bastan dos puntos?

Dos puntos definen la recta con exactitud, pero no dan ninguna estimación del error y son muy sensibles al ruido de medición, sobre todo con [S] baja. Para constantes confiables usa varias concentraciones y un ajuste adecuado.

Calculadoras relacionadas

Calculadora de Michaelis-Menten

Calcula la velocidad de una reacción enzimática con la ecuación de Michaelis-Menten a partir de Vmax, la constante Km y la concentración de sustrato, y qué % de Vmax alcanza.

Calculadora de actividad enzimática

Calcula la actividad enzimática en unidades (µmol de producto por minuto) y la actividad específica por mg de proteína a partir del producto formado, el tiempo y la cantidad de enzima.

Calculadora de peso molecular de proteínas

Estima el peso molecular de una proteína en Da y kDa a partir de su número de aminoácidos y la masa promedio por residuo (unos 110 Da), más el agua terminal.

Calculadora de factor de dilución

Calcula el factor de dilución a partir del volumen de muestra y de diluyente, exprésalo como 1:X y obtén la concentración final de tu solución madre diluida.

Esta calculadora tiene fines informativos. Verifica los resultados importantes antes de tomar decisiones.