Calculadora de Lineweaver-Burk: Km y Vmax con la gráfica de dobles recíprocos

Cómo funciona

1/v = (Km/Vmax) × (1/[S]) + 1/Vmax; Vmax = 1 ÷ ordenada al origen; Km = pendiente × Vmax; kcat = Vmax ÷ [E]

Al sacar los recíprocos, la hipérbola de Michaelis-Menten se convierte en una recta cuyas intersecciones dan directamente Vmax y Km: la forma clásica de leer la cinética enzimática en papel milimétrico. Su punto débil es que los recíprocos magnifican el error de las velocidades más pequeñas, que quedan muy a la derecha y arrastran el ajuste. Hoy se prefiere ajustar la hipérbola por regresión no lineal y usar esta gráfica para presentar los datos y diagnosticar el tipo de inhibidor: las rectas de un inhibidor competitivo se cruzan en el eje y, y las de uno no competitivo en el eje x.

Ejemplo resuelto

Sofía mide seis velocidades iniciales (9.1, 15.4, 24.0, 33.3, 41.7 y 47.6 µM/min) con sustrato de 0.5 a 16 mM. El ajuste de 1/v contra 1/[S] da una pendiente de 0.0459 y una ordenada al origen de 0.0185 (R² 0.9999). Entonces Vmax = 1 ÷ 0.0185 ≈ 54.1 µM/min y Km = 0.0459 × 54.1 ≈ 2.48 mM. Con 0.01 µM de enzima, kcat = 54.1 ÷ 0.01 ≈ 5,411 min⁻¹ y la eficiencia catalítica es 5,411 ÷ 2.48 ≈ 2,180.

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