Calculadora de pase celular: qué dilución (split) usar según la confluencia
Planea el pase de tus células: con la confluencia actual, el tiempo de duplicación y cuándo las necesitas, obtén la dilución (split) ideal y la confluencia que tendrán.
Cómo funciona
Dilución = confluencia actual (%) × 2^(horas ÷ tiempo de duplicación) ÷ confluencia deseada (%)
Las células crecen de forma exponencial, así que la dilución correcta depende de cuántas duplicaciones caben antes de que vuelvas al laboratorio. En 72 horas, con un tiempo de duplicación de 24 horas, la población crece 8 veces; por eso unas células al 90% necesitan una dilución de alrededor de 1:9 para llegar al 80%. Las diluciones habituales (de 1:3 a 1:10) funcionan bien; pasar de 1:20 puede hacer que muchas líneas tarden en recuperarse.
Ejemplo resuelto
Luis tiene sus HeLa al 90% de confluencia, se duplican cada 24 h y las necesita al 80% dentro de 72 h. Crecerán 2^(72 ÷ 24) = 8 veces, así que la dilución ideal es 90 × 8 ÷ 80 = 9, que redondea a 1:10. Con 1:10 llegarán al 90 × 8 ÷ 10 = 72% a las 72 h y tocarán el 80% hacia las 76 h (3.2 días). Si hiciera un 1:5, estarían sobreconfluentes antes de tiempo.
Preguntas frecuentes
¿Cómo sé el tiempo de duplicación de mis células?
Cuenta las células en dos momentos de la fase exponencial y aplica TD = t × ln 2 ÷ ln(N₂/N₁). La calculadora de tiempo de duplicación celular lo hace por ti.
¿Por qué conviene registrar las duplicaciones de población y no solo el número de pase?
El número de pase depende de las diluciones que uses; las duplicaciones acumuladas reflejan la edad real del cultivo, que es lo que importa para la senescencia y la deriva del fenotipo.
¿Qué significa hacer un pase 1:10?
Que repartes las células de un frasco en un volumen diez veces mayor, por ejemplo, 1 mL de suspensión en 10 mL totales, o un frasco en diez frascos iguales.
¿Qué pasa si las células llegan al 100% de confluencia?
Al quedarse sin espacio, muchas líneas dejan de dividirse, cambian su fenotipo o empiezan a morir. Conviene hacer el pase antes, entre el 70% y el 90%.
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