Calculadora de OD600 a número de células: convierte la densidad óptica en células/mL
Convierte una lectura de OD600 en células por mL y células totales del cultivo con tu factor de calibración (por ejemplo, 8 × 10⁸ células/mL por unidad de OD en E. coli).
Cómo funciona
Células/mL = OD600 × factor de calibración · Células totales = células/mL × volumen (mL)
La densidad óptica a 600 nm mide la luz que dispersan las células y, dentro del rango lineal (más o menos OD 0.1 a 0.8 en E. coli), es proporcional a su concentración. El factor de calibración, es decir, las células por mL a OD 1.0, debes medirlo para tu propia cepa, tu espectrofotómetro y tu paso óptico, porque los valores publicados van de unos 5 × 10⁸ a 1 × 10⁹. Por encima del rango lineal la lectura se satura y subestima el conteo real, así que los cultivos densos conviene diluirlos antes de leer.
Ejemplo resuelto
Sofía lee una OD600 de 0.5 y usa un factor de 8 × 10⁸ células/mL por unidad de OD: 0.5 × 8 × 10⁸ = 4 × 10⁸ células/mL. En su cultivo de 10 mL eso da 4 × 10⁸ × 10 = 4 × 10⁹ células. Si el cultivo fuera de 20 mL, tendría 8 × 10⁹ células.
Preguntas frecuentes
¿El factor de OD a células es universal?
No. Depende del organismo, del tamaño y la forma de las células, del espectrofotómetro y del paso óptico de la celda. Calíbralo contra conteos de colonias o una cámara de conteo con tu propio equipo.
¿Por qué hay que diluir un cultivo denso antes de leerlo?
Por encima de una OD de alrededor de 0.8, la relación lineal se pierde porque la luz dispersada vuelve a dispersarse, y la lectura subestima el número de células. Diluir hasta el rango lineal y multiplicar por la dilución devuelve la exactitud.
¿La OD600 cuenta células muertas?
Sí: la dispersión de luz no distingue células vivas de muertas, así que la OD600 refleja la biomasa total. Para contar solo células viables, usa el recuento de UFC en placa.
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Esta calculadora tiene fines informativos. Verifica los resultados importantes antes de tomar decisiones.